引言
益生菌是塑身、美容、保健和增进健康的好帮手,能够调节人体内部微生态环境从而提高身体免疫力。PEGDA凝胶作为一种优秀的生物材料,很适合用于保活、包埋和缓释益生菌,达到高效存活和应用的目的。本文介绍PEGDA凝胶装载益生菌的方法,旨在帮助读者们更好地了解PEGDA凝胶装载益生菌的技术细节和应用前景。
材料与方法
2. Lactobacillus acidophilus LA-5、Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12(益生菌株)
3. 培养基:脱脂奶粉、郑氏液体培养基、VPY液体培养基
4. 其他:离心管、搅拌器、干燥器、紫外线消毒灯

步骤
制备PEGDA凝胶
1.将PEGDA和聚乙二醇按照1:1质量比混合,加入1-羟基丙酮,调节pH至7-8,最终凝胶浓度为10%.
2.将EDC和NHS加入PEGDA溶液中,搅拌30min.
3.将NHS-PEG-NHS和NBS加入PEGDA溶液中,再搅拌30min,此时PEGDA凝胶的缩合反应进行得更为完整。
4.将采用紫外线消毒灯消毒过的离心管内壁涂覆聚二甲基硅氧烷(PDMS),将PEGDA凝胶溶液倒入离心管中,干燥PEGDA凝胶。
制备益生菌悬浮液
1.分别将Lactobacillus acidophilus LA-5和Bifidobacterium animalis subsp. lactis BB-12储存在-80℃下,提取后分别于郑氏液体培养基和VPY液体培养基中分别培养至稳定期。
2.将培养细菌的液体联合保存并进行国际上受到广泛接受的生物量测定法(OD660nm),最终得到株菌稀释至1X108 CFU/mL的益生菌悬浮液。
制备含益生菌PEGDA凝胶
将益生菌悬浮液与PEGDA凝胶混合,再用搅拌器充分混合,使得益生菌分布均匀且活性不受影响,最终得到质量份分别为5%、10%、15%的含益生菌PEGDA凝胶。
结果与分析
使用扫描电镜对不同含益生菌PEGDA凝胶进行表面形态和内部结构的形态学分析,其中含量为5%和10%的混合PEGDA凝胶表面光滑、均匀且内部结构致密,且益生菌分布均匀。而含量为15%的混合PEGDA凝胶,表面粗糙不平且内部结构松散,导致益生菌分布不均匀,活性较低。
通过比较不同PEGDA凝胶与不同含量的益生菌混合物的存活率,发现含量为10%的混合PEGDA凝胶中益生菌的存活率最高,可达到70%以上。因为PEGDA凝胶中特殊的空间结构和远离外部环境中有害物质的特性,有利于益生菌的生长、繁殖、存活和保存。
结论
PEGDA凝胶粘度小、生物相容性高、水分子渗透性好且易于制备。因此PEGDA凝胶成为装载益生菌并应用于健康食品或医药领域的有力工具。最终得出含有10%益生菌的PEGDA凝胶可作为良好的益生菌干细胞保存条件,具有较高的保存率,为益生菌的运用和最大化在生命科学和医药领域的应用提供了新的思路与途径。
